Podwójna rola imidazolu jako aktywatora inhibitora β-glukozydazy ze słodkich migdałów (Prunus dulcis).
Adam
- 0
Oznaczono aktywność β-glukozydazy Prunus dulcis (ze słodkich migdałów) kosztem p-nitrofenylo-β-d-glukopiranozydu przy pH 6, zarówno w stanie stacjonarnym, jak i przedstacjonarnym. Stosując surowe preparaty enzymatyczne zaobserwowano konkurencyjne hamowanie przez 1-5 mM imidazol w obu badanych warunkach kinetycznych. Jednakże, gdy do mieszanin reakcyjnych dodano imidazol w stężeniu 0,125-0,250 mM, wykryliśmy znaczną aktywację enzymu. W celu dalszego zbadania tego efektu wywieranego przez imidazol, β-glukozydazę oczyszczono do jednorodności. Wyizolowano dwie izoformy enzymu, tj. monomer pełnej długości i dimer zawierający podjednostkę pełnej długości i skróconą.
- Stwierdzono, że dimeryczna β-glukozydaza działa znacznie lepiej niż enzym monomeryczny, niezależnie od warunków kinetycznych stosowanych do oznaczenia aktywności enzymu. Ponadto stwierdzono, że wrażliwość obu izoform na imidazol różni się.
- Chociaż rzeczywiście stwierdzono, że enzym monomeryczny jest stosunkowo niewrażliwy na imidazol, zaobserwowano, że dimeryczna β-glukozydaza jest znacząco aktywowana przez 0,125-0,250 mM imidazol w warunkach stanu wstępnego.
- Ponadto testy w stanie stacjonarnym wykazały, że dodanie 0,125 mM imidazolu do mieszanin reakcyjnych zwiększa Km enzymu dimerycznego z 2,3 do 6,7 mM. Proponuje się, że aktywacja dimeru β-glukozydazy przez imidazol odbywa się poprzez przejście konformacyjne pozycjonujące enzym w kierunku sprawnej katalizy.
Synteza arabinoamidyny i jej hamowanie w kierunku β – glukozydazy ( słodkie migdały ) w porównaniu z biblioteką galaktonoamidyn.
Mając na celu opracowanie silnych inhibitorów β-glukozydaz, zbadano małą bibliotekę galaktonoamidyn i jedną arabinoamidynę wyprowadzoną analogicznie jako inhibitory β-glukozydazy ze słodkich migdałów. Wykazano, że pięcioczłonowy glikon w arabinoamidynie oddziałuje z donorem protonów w miejscu aktywnym enzymu zatrzymującego, ale nie z nukleofilem. W przeciwieństwie do tego, odpowiednia galaktonoamidyna z sześcioczłonowym glikonem i identycznym aglikonem oddziałuje z obydwoma promującymi hydrolizę aminokwasami w miejscu aktywnym i hamuje enzymatyczną hydrolizę β-glukozydów w zakresie niskich stężeń nanomolowych. Chociaż oba inhibitory są konkurencyjne, ich zdolność hamowania jest ponad 37 000 razy różna.
Enzymatyczna synteza glikozydów cholekalcyferolu z wykorzystaniem β – glukozydazy ze słodkich migdałów .
β-Glukozydaza ze słodkich migdałów (Amygdalus communis var. ‘Dulcis’) uwięziona na kulkach alginianu wapnia katalizowała syntezę rozpuszczalnego w wodzie 17-O-(D-glukopiranozylo)cholekalcyferolu. Optymalnymi warunkami reakcji były: 60% (wag./wag. D-glukozy) β-glukozydazy, 0,12 mM bufor fosforanowy o pH 6 i 30-godzinny okres inkubacji. β-Glukozydaza katalizowała również reakcję z D-glukozą 2, D-galaktozą 3, D-mannozą 4 i D-fruktozą 5 z ogólnie niską wydajnością w zakresie 3-14%. Oba anomery α/β D-glukozy 2, D-galaktozy 3 i D-mannozy 4 przereagowały, z których dwa pierwsze utworzyły również pochodne C6-O.
Analiza liazy mandelonitrylowej i beta – glukozydazy ze słodkich migdałów kombinowanymi technikami elektroforetycznymi
Migdały są bogatym źródłem liazy migdałowej (oksynitrylazy) i beta-glukozydazy. Izolacja tych dwóch enzymów ze słodkich migdałów wymaga frakcjonowanego wytrącania siarczanem amonu, a następnie chromatografii jonowymiennej na kolumnach dietyloaminoetylo-(DEAE) i karboksymetylocelulozy (CMC). W niniejszym badaniu do scharakteryzowania tych dwóch enzymów zastosowano różne techniki elektroforetyczne, takie jak elektroforeza w żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu (SDS-PAGE), ogniskowanie izoelektryczne w unieruchomionych gradientach pH (IEF-IPG) i elektroforeza kapilarna.
Po raz pierwszy beta-glukozydaza i oksynitrylaza zostały rozdzielone w unieruchomionym gradiencie pH równym jednej jednostce pH. Elektroforeza strefowa kapilarna (CZE) była doskonałym narzędziem do analizy czystości preparatów enzymatycznych, umożliwiając całkowite oddzielenie różnych składników białkowych w zaledwie 15 minut. CZE wykazał zdolność rozdzielczą do rozdzielania form enzymów porównywalną z ogniskowaniem izoelektrycznym w unieruchomionym gradiencie pH.
Przypisanie beta – glukozydazy ze słodkich migdałów do rodziny 1 glikozydazy i identyfikacja jej nukleofila miejsca aktywnego.
Beta-glukozydaza ze słodkich migdałów jest dobrze zbadaną glikozydazą, która została poddana licznym analizom kinetycznym i badaniom hamowania. Jednak nie wiadomo, do której rodziny glikozydaz należy, ani tożsamość nukleofila miejsca aktywnego nie jest znana z pewnością. Można go inaktywować za pomocą specyficznego, opartego na mechanizmie inaktywatora enzymu, fluorku 2-deoksy-2-fluoro-beta-D-glukopiranozylu, który działa poprzez tworzenie stabilnego produktu pośredniego enzymu 2-deoksy-2-fluoro-alfa-D-glukopiranozylu .

- Glikozylowany peptyd obecny w trawieniu trawiennym tego uwięzionego glikozylowego enzymu pośredniego zidentyfikowano przez zastosowanie skanów strat obojętnych na potrójnym kwadrupolowym spektrometrze mas z jonizacją przez elektrorozpylanie.
- Porównawcza analiza chromatograficzna cieczowa/spektrometria masowa trawienia trawiennego znakowanych i niewyznakowanych próbek enzymu potwierdziła unikalną obecność tego peptydu m/z = 1041 w znakowanej próbce.
- Sekwencja tego peptydu została określona jako Ile-Thr-Glu-Gln-Gly-Val-Asp-Glu przez dalszą tandemową analizę spektrometrii masowej w trybie skanowania jonów potomnych w połączeniu z degradacją Edmana oczyszczonego peptydu.
- Tożsamość znakowanego łańcucha bocznego została określona przez dalszą tandemową analizę spektrometrii masowej w trybie skanowania jonów potomnych częściowo oczyszczonej próbki znakowanego peptydu poddanej estryfikacji metylu, przy czym wzór fragmentacji jest zgodny tylko z pierwszym Glu w znakowanej sekwencji .
- Sekwencja wokół tej reszty jest identyczna z sekwencją otaczającą katalityczny nukleofil u wielu członków rodziny glikozydaz 1, co potwierdza przypisanie tego enzymu do tej rodziny.
- Znakowana reszta jest jednak inna niż ta (Asp) zidentyfikowana wcześniej w enzymie z gorzkich migdałów przy użyciu znaczników powinowactwa epoksydu konduritolu, chociaż najwyraźniej jest blisko w sekwencji pierwszorzędowej.
Specyfika substratowa beta słodkich migdałów – glukozydazy
Aktywności beta-glukozydazy, beta-galaktozydazy, beta-ksylozydazy i alfa-L-arabinozydazy częściowo oczyszczonego preparatu emulsyny migdałowej badano za pomocą chromatografii, elektroforezy w żelu poliakrylamidowym i ogniskowania izoelektrycznego. Stwierdzono, że beta-glukozydaza występuje jako dwa składniki o jednakowej masie cząsteczkowej. Agregacja składników z nieaktywnymi białkami prawdopodobnie powoduje pojawienie się wielu form natywnych, które mają podobne specyficzne aktywności. W żadnym przypadku nie uzyskano oddzielenia aktywności beta-glukozydazy od aktywności towarzyszącej. Stwierdza się zatem, że te aktywności są wykazywane przez enzym, który nie jest ściśle specyficzny dla stereochemii C4, C6 dla heksozydów i do stereochemii C4, C5 dla pentozydów.
Specyficzne nieodwracalne hamowanie beta – glukozydazy ze słodkich migdałów przez niektóre beta- glikopiranozylepoksyalkany i izotiocyjanian beta -d-glukopiranozylu.
beta-D-glukopiranozylo-(1S i 1R)-epoksyetany (I i II), 1-(beta-D-glukopiranozylo)-(2R i 2S)-2,3-epoksypropany (III i IV), beta-D- Izotiocyjanian glukopiranozylu (V) i beta-D-galaktopiranozylepoksyetan (VI) są nieodwracalnymi inhibitorami skierowanymi do miejsca aktywnego beta-glukozydazy ze słodkich migdałów (beta-D-glukozydoglukohydrolazy, EC 3.2.1.21). Utworzenie wiązania kowalencyjnego jest poprzedzone związaniem tych inhibitorów w miejscu aktywnym enzymu. Świadczy o tym konkurencyjny charakter hamowania składnika B beta-glukozydazy przez związki I-VI we wczesnym okresie oraz ochrona enzymu przed inaktywacją przez jego konkurencyjne inhibitory D-glukozę i 1,5-D-glukonolakton.
Native Sweet almond β-Glucosidase |
|||
DIA-195 | Creative Enzymes | 10KU | 324 EUR |
b-Glucosidase (1000 U/mg), Sweet Almonds |
|||
BGS-01 | Alpha Diagnostics | 5 mU | 634.8 EUR |
b-Glucosidase (2500 U/mg), Sweet Almonds |
|||
BGS-02 | Alpha Diagnostics | 5 mU | 781.2 EUR |
beta-Glucosidase, from almonds |
|||
GZ4898-100U | Glentham Life Sciences | 100 U | 132 EUR |
beta-Glucosidase, from almonds |
|||
GZ4898-250U | Glentham Life Sciences | 250 U | 228 EUR |
beta-Glucosidase, from almonds |
|||
GZ4898-100 | Glentham Life Sciences | 100 | 79.1 EUR |
beta-Glucosidase, from almonds |
|||
GZ4898-250 | Glentham Life Sciences | 250 | 158.2 EUR |
Beta glucosidase 2 antibody |
|||
70R-50259 | Fitzgerald | 100 ul | 292.8 EUR |
beta glucosidase 2 Antibody |
|||
20-abx008826 | Abbexa |
|
|
beta glucosidase 2 Blocking Peptide |
|||
20-abx063134 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GBA) Antibody |
|||
20-abx318963 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GBA) Antibody |
|||
abx233369-100ug | Abbexa | 100 ug | 661.2 EUR |
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody |
|||
20-abx172569 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GBA) Antibody |
|||
20-abx215562 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GBA) Antibody |
|||
20-abx112738 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody |
|||
20-abx102145 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody |
|||
20-abx102146 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody |
|||
20-abx102147 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody |
|||
20-abx102148 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GBA) Antibody |
|||
20-abx005832 | Abbexa |
|
|
Recombinant Glucosidase Beta, Acid (GbA) |
|||
4-RPC511Hu01 | Cloud-Clone |
|
|
Recombinant Glucosidase Beta, Acid (GbA) |
|||
4-RPC511Hu02 | Cloud-Clone |
|
|
Recombinant Glucosidase Beta, Acid (GbA) |
|||
4-RPC511Mu01 | Cloud-Clone |
|
|
Recombinant Glucosidase Beta, Acid (GbA) |
|||
4-RPC511Ra01 | Cloud-Clone |
|
|
ELISA kit for Mouse ?-Glu (Beta Glucosidase) |
|||
E-EL-M1265 | Elabscience Biotech | 1 plate of 96 wells | 640.8 EUR |
Rat Glucosidase Beta, Acid (GbA) Protein |
|||
20-abx066806 | Abbexa |
|
|
Human Glucosidase Beta Acid ELISA Kit |
|||
ELA-E2511h | Lifescience Market | 96 Tests | 988.8 EUR |
Glucosidase 2 Subunit Beta (GLU2B) Antibody |
|||
20-abx013391 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GBA) Antibody (HRP) |
|||
20-abx319273 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody (FITC) |
|||
20-abx271239 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody (FITC) |
|||
20-abx271288 | Abbexa |
|
|
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) Protein |
|||
20-abx066804 | Abbexa |
|
|
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) Protein |
|||
20-abx066805 | Abbexa |
|
|
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) Protein |
|||
20-abx066807 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GBA) Antibody (FITC) |
|||
20-abx319274 | Abbexa |
|
|
Pig Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
abx361797-96tests | Abbexa | 96 tests | 990 EUR |
Cow Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
abx516970-96tests | Abbexa | 96 tests | 1093.2 EUR |
Rat Acid Glucosidase Beta(AGb)ELISA kit |
|||
GA-E0662RT-48T | GenAsia Biotech | 48T | 380.4 EUR |
Rat Acid Glucosidase Beta(AGb)ELISA kit |
|||
GA-E0662RT-96T | GenAsia Biotech | 96T | 595.2 EUR |
Rat Acid Glucosidase Beta(AGb)ELISA kit |
|||
QY-E10990 | Qayee Biotechnology | 96T | 433.2 EUR |
Glucosidase 2 subunit beta Antibody (HRP) |
|||
20-abx108293 | Abbexa |
|
|
Human Glucosidase 2 subunit beta (PRKCSH) |
|||
1-CSB-RP029254h | Cusabio |
|
|
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) CLIA Kit |
|||
20-abx190348 | Abbexa |
|
|
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) CLIA Kit |
|||
20-abx496335 | Abbexa |
|
|
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA)CLIA Kit |
|||
SCC511Hu-10x96wellstestplate | Cloud-Clone | 10x96-wells test plate | 6777.36 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA)CLIA Kit |
|||
SCC511Hu-1x48wellstestplate | Cloud-Clone | 1x48-wells test plate | 663.31 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA)CLIA Kit |
|||
SCC511Hu-1x96wellstestplate | Cloud-Clone | 1x96-wells test plate | 896.16 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA)CLIA Kit |
|||
SCC511Hu-5x96wellstestplate | Cloud-Clone | 5x96-wells test plate | 3672.72 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) CLIA Kit |
|||
4-SCC511Hu | Cloud-Clone |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody (Biotin) |
|||
20-abx271505 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody (Biotin) |
|||
20-abx271554 | Abbexa |
|
|
Glucosidase 2 subunit beta Antibody (FITC) |
|||
20-abx106873 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GBA) Antibody (Biotin) |
|||
20-abx319275 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody (Biotin) |
|||
20-abx272279 | Abbexa |
|
|
Glucosidase Beta, Acid (GbA) Antibody (Biotin) |
|||
20-abx274348 | Abbexa |
|
|
Human Glucosidase beta , Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
20-abx151633 | Abbexa |
|
|
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
20-abx258746 | Abbexa |
|
|
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
abx254961-96tests | Abbexa | 96 tests | 904.8 EUR |
Human Acid Glucosidase Beta (AGb)ELISA kit |
|||
201-12-2225 | SunredBio | 96 tests | 528 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
abx573914-96tests | Abbexa | 96 tests | 801.6 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
abx516972-96tests | Abbexa | 96 tests | 904.8 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
DLR-GbA-Hu-48T | DL Develop | 48T | 620.4 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
DLR-GbA-Hu-96T | DL Develop | 96T | 807.6 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
DLR-GbA-Mu-48T | DL Develop | 48T | 632.4 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
DLR-GbA-Mu-96T | DL Develop | 96T | 825.6 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid(GbA)ELISA kit |
|||
GA-E0759MS-48T | GenAsia Biotech | 48T | 403.2 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid(GbA)ELISA kit |
|||
GA-E0759MS-96T | GenAsia Biotech | 96T | 640.8 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
SEC511Hu-10x96wellstestplate | Cloud-Clone | 10x96-wells test plate | 5677.8 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
SEC511Hu-1x48wellstestplate | Cloud-Clone | 1x48-wells test plate | 572.76 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
SEC511Hu-1x96wellstestplate | Cloud-Clone | 1x96-wells test plate | 766.8 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
SEC511Hu-5x96wellstestplate | Cloud-Clone | 5x96-wells test plate | 3090.6 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
4-SEC511Hu | Cloud-Clone |
|
|
Human Glucosidase Beta, Acid ELISA Kit (GbA) |
|||
RK01445 | Abclonal | 96 Tests | 625.2 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RDR-GbA-Hu-48Tests | Reddot Biotech | 48 Tests | 652.8 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RDR-GbA-Hu-96Tests | Reddot Biotech | 96 Tests | 907.2 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RDR-GbA-Mu-48Tests | Reddot Biotech | 48 Tests | 668.4 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RDR-GbA-Mu-96Tests | Reddot Biotech | 96 Tests | 928.8 EUR |
Mouse Acid Glucosidase Beta(AGb)ELISA kit |
|||
QY-E20034 | Qayee Biotechnology | 96T | 433.2 EUR |
Human Acid Glucosidase Beta(AGb)ELISA Kit |
|||
QY-E01366 | Qayee Biotechnology | 96T | 433.2 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RD-GbA-Hu-48Tests | Reddot Biotech | 48 Tests | 625.2 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RD-GbA-Hu-96Tests | Reddot Biotech | 96 Tests | 867.6 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RD-GbA-Mu-48Tests | Reddot Biotech | 48 Tests | 639.6 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RD-GbA-Mu-96Tests | Reddot Biotech | 96 Tests | 888 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RD-GbA-Hu-48T | Reddot Biotech | 48T | 452.7 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RD-GbA-Hu-96T | Reddot Biotech | 96T | 646.7 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RD-GbA-Mu-48T | Reddot Biotech | 48T | 464.3 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RD-GbA-Mu-96T | Reddot Biotech | 96T | 663.3 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA)ELISA kit |
|||
YLA1023MO-48T | Shanghai YL Biotech | 48T | 465 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA)ELISA kit |
|||
YLA1023MO-96T | Shanghai YL Biotech | 96T | 600 EUR |
Human Acid Glucosidase Beta (AGb)ELISA kit |
|||
YLA2978HU-48T | Shanghai YL Biotech | 48T | 435 EUR |
Human Acid Glucosidase Beta (AGb)ELISA kit |
|||
YLA2978HU-96T | Shanghai YL Biotech | 96T | 562.5 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RDR-GbA-Hu-48T | Reddot Biotech | 48T | 475.34 EUR |
Human Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RDR-GbA-Hu-96T | Reddot Biotech | 96T | 679.04 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RDR-GbA-Mu-48T | Reddot Biotech | 48T | 487.52 EUR |
Mouse Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
RDR-GbA-Mu-96T | Reddot Biotech | 96T | 696.47 EUR |
Glucosidase 2 Subunit Beta (PRKCSH) Antibody |
|||
20-abx109818 | Abbexa |
|
|
Glucosidase 2 subunit beta Antibody (Biotin) |
|||
20-abx105455 | Abbexa |
|
|
Rabbit Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
abx362613-96tests | Abbexa | 96 tests | 990 EUR |
Monkey Glucosidase Beta, Acid (GbA) ELISA Kit |
|||
abx360010-96tests | Abbexa | 96 tests | 990 EUR |
Human Cytosolic beta- glucosidase, GBA3 ELISA KIT |
|||
ELI-05195h | Lifescience Market | 96 Tests | 988.8 EUR |
×
Epoksydy I-IV są wiązane kowalencyjnie ze składnikiem B w stosunku molowym 1:1, jak pokazano za pomocą inhibitorów znakowanych 14C. Uwolnienie znacznika ze zmodyfikowanego enzymu (kowalencyjne El) przez traktowanie hydroksyloaminą sugeruje tworzenie wiązania estrowego między inhibitorami I-IV a grupą karboksylową miejsca aktywnego enzymu. Krzywa zależności od pH szybkości inaktywacji beta-glukozydazy B ma kształt dzwonu dla V i esowaty dla I-IV i wskazuje na udział grup centrów aktywnych o pKa 5,6-5,9 i 4,2-4,4 .