Wymiana ośrodka akustofluidalnego w celu przygotowania bakterii elektrokompetentnych za pomocą pułapki na ścianie kanału
Adam
- 0
Kompleksowa integracja etapów procesu w zminiaturyzowanej wersji przepływów pracy biologii syntetycznej pozostaje kluczowym zadaniem w automatyzacji projektowania biosystemów. Jednak każdy z tych etapów procesu ma określone wymagania w odniesieniu do warunków środowiskowych, w tym w szczególności składu otaczającego płynu, co sprawia, że integracja jest uciążliwa. Przykładowo transformacja, czyli przeprogramowanie bakterii poprzez dostarczenie egzogennego materiału genetycznego (takiego jak DNA) do cytoplazmy, jest kluczowym procesem w inżynierii molekularnej i ogólnie w nowoczesnej biotechnologii.
- Transformacja odbywa się często poprzez elektroporację, czyli tworzenie porów w membranie za pomocą wstrząsów elektrycznych w środowisku o niskiej przewodności. Jednak przygotowanie komórek do elektroporacji może być kłopotliwe, ponieważ wymaga wymiany pożywki wzrostowej (o wysokiej przewodności) na pożywkę o niskiej przewodności, zazwyczaj przeprowadzanej poprzez wiele czasochłonnych etapów wirowania.
- Aby uprościć i zminiaturyzować ten krok, opracowaliśmy urządzenie akustofluidyczne zdolne do nieinwazyjnego łapania bakterii Escherichia coli w celu późniejszej wymiany pożywki, co stanowi wyzwanie w urządzeniach akustofluidycznych ze względu na szkodliwe efekty akustycznego strumieniowania.
- Dzięki ulepszonemu procesowi wytrawiania byliśmy w stanie wytworzyć cienką ścianę pomiędzy dwoma kanałami mikroprzepływowymi, które po wzbudzeniu mogą generować pola strumieniowe, które uzupełniają siłę promieniowania akustycznego, a zatem mogą być wykorzystywane do wychwytywania bakterii. Nasza nowatorska konstrukcja skutecznie wyłapuje Escherichia coli przy szybkości przepływu 10 μL min -1 i ma wydajność odzyskiwania komórek na poziomie 47 ± 3% po przemyciu uwięzionych komórek.
- Aby zweryfikować, czy wydajność urządzenia do wymiany pożywki jest wystarczająca, przetestowaliśmy elektrokompetencję odzyskanych komórek w standardowej procedurze transformacji i stwierdziliśmy wydajność transformacji 8 × 105 CFU na μg plazmidowego DNA. Nasze urządzenie jest niskonakładową alternatywą dla metod opartych na wirowaniu i otwiera drzwi do miniaturyzacji wielu protokołów mikrobiologicznych i inżynierii molekularnej.
Transformacja ryzosferycznego szczepu Bacillus cereus sensu lato B25 przy użyciu protokołu przygotowania elektrokompetentnych komórek w temperaturze pokojowej .
Transformacja bakteryjna jest kluczowym etapem manipulacji genetycznej bakterii. Jednak bakterie Gram-dodatnie są trudne do transformacji i w związku z tym opracowano wiele różnych metodologii. Tutaj zbadaliśmy wydajność transformacji protokołu elektroporacji, zmieniając trzy główne czynniki: skład buforu do elektroporacji, siłę impulsu elektrycznego i skład ośrodka odzyskiwania. Ogólnie rzecz biorąc, wydajność transformacji została zwiększona, gdy przygotowaliśmy elektrokompetentne ogniwa w temperaturze pokojowej zamiast w lodowatej temperaturze. Wykazano, że protokół wyszczególniony w tej pracy ma zastosowanie do innego szczepu B. cereus i dwóch innych gatunków Bacillus,
Elektrokompetentne komórki bakteryjne w temperaturze pokojowej poprawiają wydajność transformacji DNA i rekombinacji.
Bakterie kompetentne komórki są niezbędne do klonowania, budowy bibliotek DNA i mutagenezy w każdym laboratorium biologii molekularnej. Spośród różnych metod transformacji, elektroporacja ma najlepszą wydajność transformacji. Dotychczasowe metody elektroporacji polegały na płukaniu i elektroporacji komórek bakteryjnych w lodowatych warunkach, które czynią je kruche i podatne na śmierć. Tutaj przedstawiamy proste metody oparte na zmianie temperatury, które poprawiają wydajność transformacji DNA i rekombinacji w E. coli i kilku innych bakteriach Gram-ujemnych, dzięki czemu oszczędzają czas i koszty. Zwiększona wydajność transformacji dużych cząsteczek DNA jest istotną zaletą, która może ułatwić klonowanie dużych fragmentów z preparatów genomowego DNA i próbek metagenomicznych.

Szybki protokół przygotowania elektrokompetentnych Escherichia coli i Vibrio cholerae
Elektroporacja stała się szeroko stosowaną metodą szybkiego i wydajnego wprowadzania obcego DNA do szerokiego zakresu komórek. Elektrotransformacja stała się preferowaną metodą wprowadzania DNA do prokariotów, które nie są naturalnie kompetentne. Elektroporacja jest szybką, wydajną i usprawnioną metodą transformacji, która oprócz oczyszczonego DNA i kompetentnych bakterii wymaga dostępnych na rynku kontrolerów pulsu genów i kuwet.
W przeciwieństwie do etapu pulsacyjnego, przygotowanie elektrokompetentnych komórek jest czasochłonne i pracochłonne, polegające na wielokrotnym wirowaniu i płukaniu w malejących objętościach sterylnej, zimnej wody lub niejonowych buforów dużych objętości kultur hodowanych do fazy średniologarytmicznej wzrost . Czas i wysiłek można zaoszczędzić, kupując elektrokompetentne komórki ze źródeł komercyjnych, ale selekcja jest ograniczona do powszechnie stosowanych szczepów laboratoryjnych E. coli.
Niniejszym rozpowszechniamy szybką i wydajną metodę przygotowania elektrokompetentnej E. coli, która jest używana od pewnego czasu w laboratoriach bakteriologicznych, i może być przystosowana do V. cholerae i innych prokariotów. Chociaż nie możemy ustalić, komu należy przypisać rozwój oryginalnej techniki, niniejszym udostępniamy ją społeczności naukowej.
Przygotowanie wysoce wydajnej elektrokompetentnej Escherichia coli przy użyciu wirowania stopniowego z gęstością glicerolu/mannitolu
Tradycyjne protokoły przygotowania Escherichia coli do elektroporacji są pracochłonne i często zapewniają bardzo zmienną wydajność transformacji. Wiele laboratoriów ucieka się do zakupu drogich, komercyjnie przygotowanych ogniw. W tym artykule opisano prostą metodę wytwarzania elektrokompetentnych bakterii E. coli przez odwirowanie bakterii przez poduszkę z glicerolem/mannitolem. Metoda jest szybka i zastępuje żmudne wieloetapowe procedury dwoma 15-minutowymi wirowaniami. Standardowe szczepy klonujące konsekwentnie wytwarzają ponad 8×10(9)transformantów/μg pUC18, podczas gdy szczepy TG1 i LE392 wykazują wydajność większą niż 3×10(10)/μg DNA.
10-minutowa metoda przygotowania wysoko elektrokompetentnych komórek Pseudomonas aeruginosa: zastosowanie transferu fragmentów DNA między chromosomami i transformacja plazmidu.
Opisano szybką metodę opartą na mikrowirówce do przygotowania elektrokompetentnych komórek Pseudomonas aeruginosa o wydajności transformacji nawet 10 000 razy większej w porównaniu z istniejącymi procedurami. Ta zwiększona wydajność umożliwia teraz wykorzystanie transformacji do wszystkich zastosowań wymagających transferu DNA. Obejmują one transfer mutacji chromosomalnych oznaczonych genami oporności na antybiotyki między szczepami P. aeruginosa, co rozwiązuje zagadkę braku wydajnej i niezawodnej procedury transdukcji tej bakterii.
Nic dziwnego, że sposób pozwala również na bardzo wydajną transformację plazmidami replikacyjnymi, z wydajnościami transformacji w zakresie od 10(7) do >10(11) transformantów na mikrogram DNA. Wreszcie, z wydajnością do >10(3) transformantów na mikrogram DNA, metoda ta w większości przypadków zastępuje koniugację w przenoszeniu niereplikatywnych plazmidów stosowanych w doświadczeniach z zastępowaniem genów, specyficzną integracją genów i mutagenezą transpozonów.
Uproszczona i wydajna metoda elektroporacji Agrobacterium tumefaciens.
Agrobacterium tumefaciens jest szeroko stosowanym narzędziem drobnoustrojów w biologii molekularnej roślin do przenoszenia DNA do komórek roślinnych i wytwarzania np. stabilnych lub przejściowych transformantów lub indukowania wyciszania genów. W naszym badaniu przedstawiamy uproszczoną wersję elektrokompetentnego przygotowania komórek, która jest nie tylko efektywna czasowo i kosztowo, ale wymaga minimalnej manipulacji komórkami bakteryjnymi. Do przygotowania kompetentnych komórek Agrobacterium zwykle stosuje się kultury płynne. Aby przezwyciężyć trudności związane z pracą z kulturami płynnymi, proponujemy zawieszenie komórek bakteryjnych bezpośrednio z hodowli na płytkach agarowych na noc.
AGL1 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1283-12 | Intact Genomics | 6/PK | 159.2 EUR |
AGL1 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1283-20 | Intact Genomics | 10x50µl | 276 EUR |
AGL1 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1283-36 | Intact Genomics | 18/PK | 439.2 EUR |
AGL1 (pSoup) ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1283PS-12 | Intact Genomics | 50μL | 284 EUR |
AGL1 (pSoup) ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1283PS-36 | Intact Genomics | 50μL | 604 EUR |
Ar.A4 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1272-12 | Intact Genomics | 6x50µl | 284 EUR |
Ar.A4 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1272-36 | Intact Genomics | 18x50µl | 604 EUR |
Ar.Qual ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1273-12 | Intact Genomics | 6x50µl | 284 EUR |
Ar.Qual ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1273-36 | Intact Genomics | 18x50µl | 604 EUR |
K599 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1287-12 | Intact Genomics | 6x50µl | 280 EUR |
K599 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1287-36 | Intact Genomics | 18x50µl | 600 EUR |
C58C1 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1286-12 | Intact Genomics | 50μL | 284 EUR |
C58C1 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1286-36 | Intact Genomics | 50μL | 604 EUR |
MSU440 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1277-12 | Intact Genomics | 50μL | 284 EUR |
MSU440 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1277-36 | Intact Genomics | 50μL | 604 EUR |
GV3101 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1282-12 | Intact Genomics | 6/PK | 159.2 EUR |
GV3101 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1282-20 | Intact Genomics | 10x50µl | 276 EUR |
GV3101 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1282-36 | Intact Genomics | 18/PK | 439.2 EUR |
EHA105 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1284-12 | Intact Genomics | 6/PK | 159.2 EUR |
EHA105 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1284-20 | Intact Genomics | 10x50µl | 276 EUR |
EHA105 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1284-36 | Intact Genomics | 18/PK | 439.2 EUR |
LBA4404 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1285-12 | Intact Genomics | 6/PK | 159.2 EUR |
LBA4404 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1285-20 | Intact Genomics | 10x50µl | 276 EUR |
LBA4404 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1285-36 | Intact Genomics | 18/PK | 439.2 EUR |
ATCC15834 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1275-12 | Intact Genomics | 50μL | 284 EUR |
ATCC15834 ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1275-36 | Intact Genomics | 50μL | 604 EUR |
ElectroCompetent Agrobacterium Combo Pack |
|||
1290-24 | Intact Genomics | 50μL | 600 EUR |
GV3101 (pSoup) ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1282PS-12 | Intact Genomics | 50μL | 296 EUR |
GV3101 (pSoup) ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1282PS-36 | Intact Genomics | 50μL | 632 EUR |
EHA105 (pSoup) ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1284PS-12 | Intact Genomics | 50μL | 284 EUR |
EHA105 (pSoup) ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1284PS-36 | Intact Genomics | 50μL | 604 EUR |
Ar. A4 ElectroCompetent Agrobacterium- 6x50µl |
|||
1272-06 | Intact Genomics | 50μL | 355 EUR |
Ar. A4 ElectroCompetent Agrobacterium- 18x50µl |
|||
1272-18 | Intact Genomics | 50μL | 755 EUR |
Ar. Qual ElectroCompetent Agrobacterium- 6x50µl |
|||
1273-06 | Intact Genomics | 50μL | 355 EUR |
Ar. Qual ElectroCompetent Agrobacterium- 18x50µl |
|||
1273-18 | Intact Genomics | 50μL | 755 EUR |
GV3101 (pSoup-19) ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1282PS19-12 | Intact Genomics | 50μL | 296 EUR |
GV3101 (pSoup-19) ElectroCompetent Agrobacterium |
|||
1282PS19-36 | Intact Genomics | 50μL | 632 EUR |
Methionine Auxotrophic LBA4404Met Electrocompetent Agrobacterium cells |
|||
1076-10 | Intact Genomics | 5x50µl | 396 EUR |
Methionine Auxotrophic LBA4404Met Electrocompetent Agrobacterium cells |
|||
1076-30 | Intact Genomics | 15x50µl | 876 EUR |
Methionine Auxotrophic EHA105Met Electrocompetent Agrobacterium cells |
|||
1278-15 | Intact Genomics | 5x50µl | 396 EUR |
Methionine Auxotrophic EHA105Met Electrocompetent Agrobacterium cells |
|||
1278-30 | Intact Genomics | 15x50µl | 876 EUR |
HB101 Electrocompetent Cells |
|||
1271-12 | Intact Genomics | 6x50μl | 100 EUR |
HB101 Electrocompetent Cells |
|||
1271-48 | Intact Genomics | 24x50μl | 372 EUR |
BL21(DE3) Electrocompetent Cells |
|||
1252-24 | Intact Genomics | 12/PK | 180 EUR |
BL21(DE3) Electrocompetent Cells |
|||
1254-48 | Intact Genomics | 12/PK | 320 EUR |
ig® 10B Electrocompetent Cells |
|||
1212-12 | Intact Genomics | 6/PK | 108 EUR |
ig® 10B Electrocompetent Cells |
|||
1212-24 | Intact Genomics | 12/PK | 204 EUR |
ig® 10B Electrocompetent Cells |
|||
1214-24 | Intact Genomics | 6/PK | 168 EUR |
ig® 10B Electrocompetent Cells |
|||
1214-48 | Intact Genomics | 12/PK | 300 EUR |
igMax™ DH10B ElectroCompetent Cells |
|||
1284-24 | Intact Genomics | 6/PK | 316 EUR |
BL21(DE3)pLysS ElectroCompetent Cells |
|||
1256-24 | Intact Genomics | 100μL | 231.2 EUR |
BL21(DE3)pLysS ElectroCompetent Cells |
|||
1256-48 | Intact Genomics | 100μL | 404 EUR |
ig® 5-alpha Electrocompetent Cells |
|||
1232-12 | Intact Genomics | 6/PK | 116 EUR |
ig® 5-alpha Electrocompetent Cells |
|||
1232-24 | Intact Genomics | 12/PK | 212 EUR |
ig® 5-alpha Electrocompetent Cells |
|||
1234-24 | Intact Genomics | 6/PK | 184 EUR |
ig® 5-alpha Electrocompetent Cells |
|||
1234-48 | Intact Genomics | 12/PK | 312 EUR |
TG1 Phage Display Electrocompetent Cells |
|||
1163-12 | Intact Genomics | 6x50µl | 156 EUR |
TG1 Phage Display Electrocompetent Cells |
|||
1163-24 | Intact Genomics | 12x50µl | 260 EUR |
TG1 Phage Display Electrocompetent Cells |
|||
1264-24 | Intact Genomics | 6/PK | 220 EUR |
TG1 Phage Display Electrocompetent Cells |
|||
1264-48 | Intact Genomics | 6/PK | 340 EUR |
ig® XL1 Blue Max ElectroCompetent Cells |
|||
1223-12 | Intact Genomics | 6x50µl | 108 EUR |
ig® XL1 Blue Max ElectroCompetent Cells |
|||
1223-24 | Intact Genomics | 12x50µl | 204 EUR |
SS320 Phage Display Electrocompetent Cells |
|||
1173-12 | Intact Genomics | 6x50µl | 172 EUR |
SS320 Phage Display Electrocompetent Cells |
|||
1173-24 | Intact Genomics | 12x50µl | 300 EUR |
ig® Stable 2 Electrocompetent E. coli Cells |
|||
1216-12 | Intact Genomics | 6x50μl | 108 EUR |
ig® Stable 2 Electrocompetent E. coli Cells |
|||
1216-24 | Intact Genomics | 12x50μl | 204 EUR |
ig® ER2738 Phage Display ElectroCompetent Cells |
|||
1217-12 | Intact Genomics | 6x100µl | 156 EUR |
ig® ER2738 Phage Display ElectroCompetent Cells |
|||
1217-24 | Intact Genomics | 12x100µl | 279.2 EUR |
ig® ccdB Resist™ Electrocompetent E. coli Cells |
|||
1269-12 | Intact Genomics | 6x50μl | 135.2 EUR |
ig® ccdB Resist™ Electrocompetent E. coli Cells |
|||
1269-24 | Intact Genomics | 12x50μl | 263.2 EUR |
SS320 Phage Display Electrocompetent Cells - 12x50µl |
|||
1272-24 | Intact Genomics | 12/PK | 397.2 EUR |
Staphylococcus aureus (S. aureus) RN4220 Electrocompetent Cells |
|||
1294-40 | Intact Genomics | 5x200µl | 564 EUR |
AGL1 Agrobacterium Strain |
|||
STR3006 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
AGL1 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0073 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
AGL1 chemically competent Agrobacterium |
|||
1083-06 | Intact Genomics | 50μL | 158.4 EUR |
AGL1 chemically competent Agrobacterium |
|||
1083-10 | Intact Genomics | 10x50µl | 264 EUR |
AGL1 chemically competent Agrobacterium |
|||
1083-18 | Intact Genomics | 50μL | 420 EUR |
A4 Agrobacterium Strain |
|||
STR3001 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
C58 Agrobacterium Strain |
|||
STR3108 | Lifescience Market | 100 ul | 394.8 EUR |
R1000 Agrobacterium Strain |
|||
STR0004 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
EHA105 Agrobacterium Strain |
|||
STR3004 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
GV3101 Agrobacterium Strain |
|||
STR3005 | Lifescience Market | 100 ul | 494.4 EUR |
GV2260 Agrobacterium Strain |
|||
STR3008 | Lifescience Market | 100 ul | 406.8 EUR |
EHA101 Agrobacterium Strain |
|||
STR3010 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
LBA9402 Agrobacterium Strain |
|||
STR3002 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
LBA4404 Agrobacterium Strain |
|||
STR3007 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
ATCC15834 Agrobacterium Strain |
|||
STR3003 | Lifescience Market | 100 ul | 406.8 EUR |
YEB Agrobacterium Growth Medium |
|||
30627031-1 | Bio-WORLD | 500 g | 104.97 EUR |
Agrobacterium (AB) Minimal Medium |
|||
30627033-1 | Bio-WORLD | 100 g | 44.72 EUR |
Agrobacterium (AB) Minimal Medium |
|||
30627033-2 | Bio-WORLD | 250 g | 101.35 EUR |
P3301/ LBA4404 Agrobacterium Strain |
|||
STR3009 | Lifescience Market | 100 ul | 864 EUR |
HT115 Agrobacterium Competent Cells |
|||
ACC-130 | Lifeasible | 10 tubes, 20 tubes, 50 tubes, 100 tubes | Ask for price |
A4 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0068 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
Ar.A4 Chemically Competent Agrobacterium |
|||
1072-06 | Intact Genomics | 50μL | 284 EUR |
Ar.A4 Chemically Competent Agrobacterium |
|||
1072-18 | Intact Genomics | 50μL | 604 EUR |
Rabbit anti-Rhizobium radiobacter (Agrobacterium tumefaciens)(Agrobacterium radiobacter) VIRD1 Polyclonal Antibody |
|||
MBS7162230-INQUIRE | MyBiosource | INQUIRE | Ask for price |
Rabbit anti-Rhizobium radiobacter (Agrobacterium tumefaciens)(Agrobacterium radiobacter) VIRD3 Polyclonal Antibody |
|||
MBS7162506-INQUIRE | MyBiosource | INQUIRE | Ask for price |
Rabbit anti-Rhizobium radiobacter (Agrobacterium tumefaciens)(Agrobacterium radiobacter) RPOA Polyclonal Antibody |
|||
MBS7162591-INQUIRE | MyBiosource | INQUIRE | Ask for price |
Rabbit anti-Rhizobium radiobacter (Agrobacterium tumefaciens)(Agrobacterium radiobacter) VIRD2 Polyclonal Antibody |
|||
MBS7164592-INQUIRE | MyBiosource | INQUIRE | Ask for price |
Rabbit anti-Rhizobium radiobacter (Agrobacterium tumefaciens)(Agrobacterium radiobacter) VIRD4 Polyclonal Antibody |
|||
MBS7164873-INQUIRE | MyBiosource | INQUIRE | Ask for price |
Ar.Qual Chemically Competent Agrobacterium |
|||
1073-06 | Intact Genomics | 50μL | 284 EUR |
Ar.Qual Chemically Competent Agrobacterium |
|||
1073-18 | Intact Genomics | 50μL | 604 EUR |
K599 Chemically Competent Agrobacterium |
|||
1087-06 | Intact Genomics | 6x50µl | 260 EUR |
K599 Chemically Competent Agrobacterium |
|||
1087-18 | Intact Genomics | 18x50µl | 580 EUR |
R1000 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0107 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
C58C1 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0108 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
C58C1 Chemically competent Agrobacterium |
|||
1086-06 | Intact Genomics | 50μL | 158.4 EUR |
C58C1 Chemically competent Agrobacterium |
|||
1086-10 | Intact Genomics | 10x50µl | 264 EUR |
C58C1 Chemically competent Agrobacterium |
|||
1086-18 | Intact Genomics | 50μL | 420 EUR |
EHA105 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0071 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
GV3101 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0072 | Lifescience Market | 100 ul | 494.4 EUR |
GV2260 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0101 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
EHA101 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0104 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
MSU440 Chemically Competent Agrobacterium |
|||
1077-06 | Intact Genomics | 6x50µl | 284 EUR |
MSU440 Chemically Competent Agrobacterium |
|||
1077-18 | Intact Genomics | 18x50µl | 604 EUR |
GV3101 chemically competent Agrobacterium |
|||
1082-06 | Intact Genomics | 50μL | 151.2 EUR |
GV3101 chemically competent Agrobacterium |
|||
1082-10 | Intact Genomics | 10x50µl | 264 EUR |
GV3101 chemically competent Agrobacterium |
|||
1082-18 | Intact Genomics | 50μL | 420 EUR |
EHA105 Chemically competent Agrobacterium |
|||
1084-06 | Intact Genomics | 50μL | 158.4 EUR |
EHA105 Chemically competent Agrobacterium |
|||
1084-10 | Intact Genomics | 10x50µl | 264 EUR |
EHA105 Chemically competent Agrobacterium |
|||
1084-18 | Intact Genomics | 50μL | 420 EUR |
LBA9402 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0069 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
LBA4404 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0074 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
LBA4404 Chemically competent Agrobacterium |
|||
1085-06 | Intact Genomics | 50μL | 158.4 EUR |
LBA4404 Chemically competent Agrobacterium |
|||
1085-10 | Intact Genomics | 10x50µl | 264 EUR |
LBA4404 Chemically competent Agrobacterium |
|||
1085-18 | Intact Genomics | 50μL | 420 EUR |
ATCC15834 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0070 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Enolase (eno) |
|||
MBS1250539-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1295 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Enolase (eno) |
|||
MBS1250539-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 975 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Enolase (eno) |
|||
MBS1250539-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 1085 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Enolase (eno) |
|||
MBS1250539-01mgEColi | MyBiosource | 0.1mg(E-Coli) | 1140 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Enolase (eno) |
|||
MBS1250539-01mgYeast | MyBiosource | 0.1mg(Yeast) | 1235 EUR |
ATCC15834 Chemically Competent Agrobacterium |
|||
1075-06 | Intact Genomics | 6x50µl | 284 EUR |
ATCC15834 Chemically Competent Agrobacterium |
|||
1075-18 | Intact Genomics | 18x50µl | 604 EUR |
Chemically competent Agrobacterium Combo Pack |
|||
1091-12 | Intact Genomics | 50μL | 556 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein 6b (6b) |
|||
MBS1084662-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1125 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein 6b (6b) |
|||
MBS1084662-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 710 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein 6b (6b) |
|||
MBS1084662-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 880 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein 6b (6b) |
|||
MBS1084662-01mgEColi | MyBiosource | 0.1mg(E-Coli) | 850 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein 6b (6b) |
|||
MBS1084662-01mgYeast | MyBiosource | 0.1mg(Yeast) | 1030 EUR |
pSoup/ GV3101 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0121 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
pSoup/ EHA105 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0126 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis GTPase Der (der) |
|||
MBS1235597-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1340 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis GTPase Der (der) |
|||
MBS1235597-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 1035 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis GTPase Der (der) |
|||
MBS1235597-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 1135 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis GTPase Der (der) |
|||
MBS1235597-01mgEColi | MyBiosource | 0.1mg(E-Coli) | 1210 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis GTPase Der (der) |
|||
MBS1235597-01mgYeast | MyBiosource | 0.1mg(Yeast) | 1290 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis GTPase obg (obg) |
|||
MBS1150225-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1240 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis GTPase obg (obg) |
|||
MBS1150225-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 905 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis GTPase obg (obg) |
|||
MBS1150225-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 1030 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis GTPase obg (obg) |
|||
MBS1150225-01mgEColi | MyBiosource | 0.1mg(E-Coli) | 1085 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis GTPase obg (obg) |
|||
MBS1150225-01mgYeast | MyBiosource | 0.1mg(Yeast) | 1175 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Glucokinase (glk) |
|||
MBS1051677-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1215 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Glucokinase (glk) |
|||
MBS1051677-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 870 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Glucokinase (glk) |
|||
MBS1051677-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 1005 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Glucokinase (glk) |
|||
MBS1051677-01mgEColi | MyBiosource | 0.1mg(E-Coli) | 1045 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Glucokinase (glk) |
|||
MBS1051677-01mgYeast | MyBiosource | 0.1mg(Yeast) | 1145 EUR |
p3301/ LBA4404 Agrobacterium tumefaciens Strains |
|||
S0102 | Lifescience Market | 100 ul | 438 EUR |
virD2 protein (Agrobacterium tumefaciens) (His tag) |
|||
80R-3437 | Fitzgerald | 50 ug | 308.4 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein ocs (ocs) |
|||
MBS1167892-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1230 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein ocs (ocs) |
|||
MBS1167892-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 895 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein ocs (ocs) |
|||
MBS1167892-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 1025 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein ocs (ocs) |
|||
MBS1167892-01mgEColi | MyBiosource | 0.1mg(E-Coli) | 1075 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein ocs (ocs) |
|||
MBS1167892-01mgYeast | MyBiosource | 0.1mg(Yeast) | 1165 EUR |
MSU440 Chemically Competent Agrobacterium- 6x50µl |
|||
1077-12 | Intact Genomics | 50μL | 355 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Formamidase (amiF) |
|||
MBS1008264-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1215 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Formamidase (amiF) |
|||
MBS1008264-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 870 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Formamidase (amiF) |
|||
MBS1008264-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 1005 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Formamidase (amiF) |
|||
MBS1008264-01mgEColi | MyBiosource | 0.1mg(E-Coli) | 1045 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Formamidase (amiF) |
|||
MBS1008264-01mgYeast | MyBiosource | 0.1mg(Yeast) | 1145 EUR |
MSU440 Chemically Competent Agrobacterium- 18x50µl |
|||
1077-36 | Intact Genomics | 50μL | 755 EUR |
Recombinant Agrobacterium radiobacter Enolase (eno) |
|||
MBS1161069-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1295 EUR |
Recombinant Agrobacterium radiobacter Enolase (eno) |
|||
MBS1161069-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 975 EUR |
Recombinant Agrobacterium radiobacter Enolase (eno) |
|||
MBS1161069-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 1085 EUR |
Recombinant Agrobacterium radiobacter Enolase (eno) |
|||
MBS1161069-01mgEColi | MyBiosource | 0.1mg(E-Coli) | 1140 EUR |
Recombinant Agrobacterium radiobacter Enolase (eno) |
|||
MBS1161069-01mgYeast | MyBiosource | 0.1mg(Yeast) | 1235 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Transaldolase (tal) |
|||
MBS1232837-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1195 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Transaldolase (tal) |
|||
MBS1232837-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 845 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Transaldolase (tal) |
|||
MBS1232837-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 985 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Transaldolase (tal) |
|||
MBS1232837-01mgEColi | MyBiosource | 0.1mg(E-Coli) | 1015 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Transaldolase (tal) |
|||
MBS1232837-01mgYeast | MyBiosource | 0.1mg(Yeast) | 1120 EUR |
Recombinant Agrobacterium tumefaciens Enolase (eno) |
|||
MBS1423095-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1295 EUR |
Recombinant Agrobacterium tumefaciens Enolase (eno) |
|||
MBS1423095-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 975 EUR |
Recombinant Agrobacterium tumefaciens Enolase (eno) |
|||
MBS1423095-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 1085 EUR |
Recombinant Agrobacterium tumefaciens Enolase (eno) |
|||
MBS1423095-01mgEColi | MyBiosource | 0.1mg(E-Coli) | 1140 EUR |
Recombinant Agrobacterium tumefaciens Enolase (eno) |
|||
MBS1423095-01mgYeast | MyBiosource | 0.1mg(Yeast) | 1235 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein TolB (tolB) |
|||
MBS1147477-002mgBaculovirus | MyBiosource | 0.02mg(Baculovirus) | 1280 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein TolB (tolB) |
|||
MBS1147477-002mgEColi | MyBiosource | 0.02mg(E-Coli) | 955 EUR |
Recombinant Agrobacterium vitis Protein TolB (tolB) |
|||
MBS1147477-002mgYeast | MyBiosource | 0.02mg(Yeast) | 1070 EUR |
×
Ponadto zoptymalizowaliśmy kilka parametrów, aby uprościć procedurę i zmaksymalizować liczbę transformantów (np. szczepy Agrobacterium, liczbę etapów płukania, ilość wymaganego plazmidowego DNA, parametry elektroporacji, rodzaj podłoża do inkubacji lub czas inkubacji). Ten zoptymalizowany, prosty i szybki protokół okazał się wystarczająco wydajny, aby uzyskać transformowane kolonie z małymi ilościami (zaledwie 1 ng) plazmidowego DNA. Ponadto umożliwiło nam to również wprowadzenie zligowanych plazmidów bezpośrednio do Agrobacterium z pominięciem etapu transformacji E. coli i dalsze przyspieszenie procedury klonowania.
Tagi: cortisol elisa kit elisa assay kit elisa kit abcam elisa kit box elisa kit price elisa kit protocol elisa kit r&d elisa kit thermofisher elisa kits distributor elisa kits distributor list elisa kits manufacturer elisa kitとは elisa test kits hmgb1 elisa kit il-6 elisa kit lassa fever igg elisa kit mybiosource elisa kit quantikine elisa kit